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本試劑僅供研究使用  標(biāo)本：血清或血漿

試驗原理：

IMA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知IMA濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。ELISA檢測試劑盒先將IMA和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IMA的濃度呈比例關(guān)系。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，ELISA檢測試劑盒甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限

6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結(jié) 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的IMA標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的IMA含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

3、ELISA檢測試劑盒檢測值范圍：0-80ng/ml

4、敏感度： 0.1 ng/ml

DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基A高糖、谷氨酰胺、丙酮酸鈉B高糖、谷氨酰胺C高糖、丙酮酸鈉D低糖、谷氨酰胺、丙酮酸鈉E無酚紅 Y74389 500毫升
RPMI 1640細(xì)胞培養(yǎng)基A谷氨酰胺、高糖B丙酮酸鈉、HEPES、高糖C高糖、谷氨酰胺、HEPESD谷氨酰胺、丙酮酸鈉、HEPES Y74390 500毫升
胰蛋白酶（0.05%）乙二胺四乙酸混合液 Y74391 100毫升
胰蛋白酶（0.25%）乙二胺四乙酸混合液 Y74392 100毫升
乙二胺四乙酸（EDTA）細(xì)胞脫離溶液 Y74393 100毫升
Hanks平衡鹽緩沖溶液（HBSS） Y74394 500毫升
Hanks鈣鎂平衡鹽緩沖溶液（HBSS） Y74395 500毫升
Hanks鈣鎂平衡鹽緩沖溶液（HBSS）不含NaHCO3 Y74396 500毫升
10倍Hanks平衡鹽緩沖溶液（HBSS） Y74397 500毫升
標(biāo)準(zhǔn)磷酸平衡鹽（PBS）緩沖溶液 Y74398 500毫升
鈣鎂磷酸平衡鹽（PBS）緩沖溶液 Y74399 500毫升
10倍磷酸平衡鹽（PBS）緩沖溶液（0.1 M） Y74400 500毫升
*氨基酸補充溶液（1X） Y74401 100毫升
*氨基酸補充溶液（10X） Y74402 100毫升
青鏈霉素混合液 Y74403 100毫升
新生牛血清 Y74404 500毫升
無激素精制胎牛血清 Y74405 100毫升
胰蛋白酶中和液 Y74406 100毫升
細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)菌污染定性熒光檢測試劑盒 Y74407 20次
細(xì)胞培養(yǎng)病毒污染溶斑法結(jié)晶紫染色試劑盒 Y74408 20次
細(xì)胞培養(yǎng)病毒污染溶斑法中性紅染色試劑盒 Y74409 20次
通用型細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體屬鑒定16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒 Y74410 20 /50次