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冬季ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)包被的必要條件
更新時(shí)間:2014-01-09   點(diǎn)擊次數(shù):1079次

質(zhì)量保證是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,許多重要的環(huán)節(jié)都會(huì)影響檢測(cè)質(zhì)量
一,樣品的因子
   干擾因素,包括內(nèi)源性因素和外源性因素的標(biāo)本,前者包括類(lèi)風(fēng)濕因子,補(bǔ)體,嗜異性抗體,抗體,溶菌酶,后者包括溶血標(biāo)本,被細(xì)菌污染,樣品儲(chǔ)存時(shí)間過(guò)長(zhǎng),試樣凝固不全,重復(fù)冷凍和解凍冷凍標(biāo)本??乖蚩贵w固定在一個(gè)過(guò)程被稱(chēng)為涂層(涂料)。換句話(huà)說(shuō),涂層是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合,取決于在固相的疏水性基團(tuán)和疏水基團(tuán)的相互作用在載體表面的蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)。ELISA試劑盒物理吸附是非特異性的,其分子量的影響,蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)的影響,濃度等。承運(yùn)人沒(méi)有對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是相同的,大分子蛋白質(zhì)通常較小的分子中含有疏水基團(tuán)越多,所以更容易吸附在固相載體表面??贵w對(duì)聚苯乙烯固體*的吸附能力,連接在段發(fā)生,抗體結(jié)合位點(diǎn)暴露在外,所以抗體涂層一般采用直接吸收法。蛋白抗原也可以使用的方法和相似的抗體包被。
二,方法論
   測(cè)定的模型包括:雙抗體夾心法,間接法,雙抗原夾心法,抗體捕獲法,競(jìng)爭(zhēng)抑制法,競(jìng)爭(zhēng)抑制實(shí)驗(yàn)(,抗體和小鼠ELISA試劑盒其他用途)的運(yùn)行時(shí)間造成的不公平競(jìng)爭(zhēng)和其他因素,重現(xiàn)性差,質(zhì)量很難控制。
三,兩個(gè),試劑因素
   在生產(chǎn)過(guò)程中,不同批次的試劑的質(zhì)量是保證*一致非常困難,甚至通過(guò)批檢驗(yàn)項(xiàng)目和結(jié)果也不同,因此必須選擇和訂購(gòu)試劑長(zhǎng)批次,并小鼠ELISA試劑盒確保保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行本標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)變化與質(zhì)量控制系統(tǒng)和復(fù)雜的過(guò)程,ELISA試劑盒重新評(píng)價(jià)試劑重新建立,并能保證結(jié)果的穩(wěn)定性;有效期短,使用率低的試劑,應(yīng)小包裝,包裝,可每次都是采取,以避免重復(fù)凍融破壞試劑引起的。
   不易吸附在聚苯乙烯載體非蛋白抗原可采用特殊涂層的方法。例如,在抗抗體的檢測(cè),使用作為包被抗原,與固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。通過(guò)紫外輻照聚苯乙烯板(如30的紫外燈,75照射12小時(shí)),以增加其吸附性能?;镜牡鞍踪|(zhì)固相載體,如多聚賴(lài)氨酸,精蛋白作為預(yù)涂層,而且可以提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素-生物素系統(tǒng)間接涂有鏈霉親和素,*涂層的載體,然后加入生物素標(biāo)記的,這個(gè)包是均勻,牢固,已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原的定量測(cè)定。

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